气相色谱分析仪测定杜仲糖类成分-赛谱仪器

　　    　　杜仲系杜仲科植物杜仲EucommiaulmoidesOliv.的干燥树皮，主产于湖北、四川、贵州、云南、陕西等地，性温，具有补肝肾、强筋骨、降血压、安胎等诸多功效。杜仲的糖类成分是近年来发现的杜仲的又一活性成分。现代药理研究表明糖类成分有提高免疫力、抗肿瘤、抗衰老等作用。利用气相色谱和质谱联用技术测定了杜仲的游离糖和多糖成分，为杜仲药材的进一步开发利用提供了实验依据。

　　    　　

　　    　　1材料与仪器

　　    　

　　    　仪器滕州赛谱分析仪器有限公司GC2010型气相色谱-质谱联用仪；RE-52AA型旋转蒸发仪；FA100小型粉碎机；DZKW-C型仪表恒温水浴锅，FA2004型电子分析天平(。

　　    　　

　　    　　2方法与结果

　　    　　

　　    　　2.1游离糖的提取杜仲药材粉碎，过60目筛，取5.0g置于索式提取器中，圆底烧瓶加入20倍的石油醚加热回流2h后，挥干石油醚，干燥。再加入20倍的乙醚回流2h，挥干乙醚，干燥。加入200ml蒸馏水100℃回流2h，过滤后药渣再加入200ml蒸馏水100℃回流2h，合并两次滤液，60℃减压浓缩至干，110℃烘箱中干燥3h，放入干燥器中备用。

　　    　　

　　    　　2.2多糖的提取取上述经粉碎过筛的杜仲样品20g，滤纸包好置于索式提取器中，分别用20倍石油醚、乙醚、80％乙醇各回流提取4h，药渣挥干溶剂，用20倍蒸馏水回流提取4h，提取液浓缩至一半体积，滤液加入无水乙醇使含醇量达80％，静置过夜，滤过，残渣用乙醚、、无水乙醇反复洗涤数次，得杜仲多糖，置硅胶干燥器中，干燥备用。

　　    　　

　　    　　2.3游离糖糖供试品的制备取上述“2.1”项提取的游离糖干燥品10mg，于90℃烘箱中干燥12h除尽水分，加入10mg羟胺，0.6ml吡啶90℃水浴30min，冷却后加入1.6ml乙酸酐，继续90℃水浴反应30min，备用。

　　    　　

　　    　　2.4多糖供试品的制备取上述“2.2”项提取的多糖样品10mg，加入2mol·L-1的三氟乙酸6ml，100℃水浴水解8h，60℃减压蒸干，加入甲醇少许减压蒸干，反复3次除去三氟乙酸，90℃烘箱中干燥12h除尽水分，加入10mg羟胺，0.6ml吡啶90℃水浴30min，冷却后加入1.6ml乙酸酐，继续90℃水浴反应30min，备用。

　　    　　

　　    　　2.5色谱条件DB-5型石英毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm)；进样口温度250℃；流量1ml·min-1；升温程序：120℃保持3min，至250℃每分钟升温8℃，250℃保持10min；质谱：EI源，电离电压70eV；检测器：FID检测器，温度220℃；进样量0.2μl，分流比30∶1，扫描范围20～600amu。

　　  有结果看出蔗糖所占的比例最大，为59.21%。葡萄糖所占比例和种类较多，另外D-木糖、D-核糖、D-阿拉伯糖、D-木糖醇、β-D-吡喃甘露糖、肌醇、纤维二糖、曲二糖也占有一定比例。    　　

　　    　　3讨论

　　    　　

　　    　　植物中的游离糖和多糖的种类众多，并且结构复杂，提取和分离比较困难，因此必须寻求一种高效分离和高灵敏度检测方法。气相和质谱联用技术是目前国际上分析糖类的有效手段，由于糖类成分没有足够的挥发性，因此进行气相分析时，必须将其衍生化成具有挥发性的衍生物，乙酰化是最常用的衍生化方法，得到的糖类衍生产物没有异构峰的产生，具有定性和定量准确的优点。