脂肪酸气相色谱法（GC）分析的具体步骤

脂肪酸气相色谱法（GC）分析的具体步骤

‌样品前处理‌：固体样品（如大豆油、动物油脂）需冷冻干燥后研磨成粉末（粒径≤0.5mm），液体样品可直接使用；准确称取50–100mg样品，加入20mL离心管中。

‌脂肪提取‌：加入混合溶剂（石油醚：乙醚=1:1），振荡5分钟，静置分层后转移上清液；重复提取三次，合并上清液于圆底烧瓶，旋转蒸发浓缩至近干。

‌甲酯化‌：向浓缩物加入2% NaOH-甲醇溶液皂化30分钟，再加入13%三氟化硼-甲醇溶液衍生化5分钟，生成脂肪酸甲酯（FAME）；冷却后加正庚烷超声20分钟，离心取上清液。

‌上机检测‌：使用火焰离子化检测器（FID），色谱柱为HP-5MS（30m×0.25mm）；设置程序升温（初始70°C，以5°C/min升至250°C），进样量1μL，通过保留时间比对标准品定量饱和/不饱和脂肪酸（如C16:0、C18:1）。

‌反式脂肪酸专项检测‌：优化色谱条件（如增加等温段），特异性分离反式异构体（如C18:1t），定量限达0.1%。