适用于蛋白质分析的色谱柱类型及技术特点
一、体积排阻色谱(SEC)柱
分离原理
基于蛋白质流体动力学半径(非绝对分子量)进行分离,大分子先洗脱,小分子后洗脱
沃特世ACQUITY Premier系列:采用亚2 µm颗粒技术,专为糖蛋白和SEC蛋白分析设计,可显著提升分离速度
MaxPeak Premier SEC柱:优化孔径设计,适用于单克隆抗体(mAb)等生物治疗蛋白的聚合物片段分析
二、反相色谱(RP)柱
C18/C8柱
安捷伦AdvanceBio系列:1.8 µm颗粒填料,提供超高分离度,适用于疏水性蛋白质分析(如胰岛素氧化修饰)
Poroshell 300SB-C18:内径2.1mm×75mm,5 µm填料,可快速分离多肽和蛋白质(如溶菌酶、卵清蛋白)。
亲水作用色谱(HILIC)柱
适用于极性蛋白质分离,与质谱兼容性高。
三、离子交换色谱(IEX)柱
生物制药专用柱:用于天然完整蛋白质分离,优化单抗氧化和药物-抗体比(DAR)测量
四、疏水作用色谱(HIC)柱
AdvanceBio HIC柱:单一固定相设计,稳定性高,适用于mAb等生物治疗蛋白的纯化
五、药典专用柱
ChromCore Sugar-FL茯苓专用柱:针对2025版药典β-葡聚糖检测需求,采用单分散硅胶微球,柱效>5000
六、微柱技术
微柱反相色谱:内径<2.1mm,提升浓缩效率和检测灵敏度,流速需按柱径平方比调整(如1.5mm柱流速约100 µL/min)。
注:选择时需结合目标蛋白特性(分子量、极性)和分析需求(分离速度、灵敏度)。SEC适合分子量分级,RP/HIC适用于疏水或修饰分析